Molekylær diagnose: hva det er og hva det er for

Den molekylære diagnosen tilsvarer et sett med molekylære teknikker som tar sikte på å identifisere endringer i DNA som kan være indikativ for genetiske sykdommer eller kreft, for eksempel. I tillegg blir molekylære teknikker mye brukt for identifisering og bekreftelse av smittsomme sykdommer, siden de representerer en raskere og mer nøyaktig diagnostisk metode.

Molekylær diagnose er dyr og derfor ikke veldig ofte forespurt av leger, men gir det nøyaktige resultater om tilstedeværelsen av endringen, måten det kan forstyrre i organismenes virkemåte og pasientens respons på sykdommen. behandling.

Hva er det for

Molekylær diagnose kan utføres med flere mål, de viktigste er:

• Identifikasjon av mutasjoner relatert til leukemi, slik som identifisering av BCR-ABL-translokasjon, som er karakteristisk for kronisk myeloid leukemi (CML);
• Mutasjoner som er karakteristiske for hematologiske sykdommer, for eksempel arvelig hemokromatose, polycytemi vera, essensiell trombocytemi og trombofilier, for eksempel - forstå hva som er trombofili og hvordan behandlingen er utført;
• Molekylære endringer som indikerer forekomsten av kreft, for eksempel kolorektal, lunge, bryst og hjernekreft, for eksempel;
• Diagnose av smittsomme sykdommer som hepatitt, uretitt, toxoplasmose, leishmaniasis, etc., i tillegg til å identifisere HPV-viruset .

Molekylær diagnose, til tross for å bli vurdert dyr i forhold til andre diagnostiske teknikker, er mer nøyaktig, siden den er i stand til å informere endringen relatert til en bestemt sykdom og graden av innflytelse av denne endringen i organismen, og dermed bidra til behandlingen av personen.

I tillegg til å bli brukt til diagnose av ulike sykdommer, er molekylære teknikker også brukt til å evaluere responsen på behandling, spesielt hos personer med kreft, som er en av de mest effektive metodene for å indikere sykdomsutvikling og tilbakefall.

Hvordan det er gjort

Molekylær diagnose kan utføres med hvilken som helst prøve, og legen blir bedt om å gi opplysninger om pasientens tilstand, som kan være urin, spytt eller, mesteparten av tiden, blod. Det er ikke nødvendig å raskt eller noe annet forberedelse til eksamen.

Prøven samles inn og sendes til laboratoriet sammen med legenes råd og informerer eksamen eller type forskning som skal gjøres. Den utførte molekylære teknikken avhenger av den forespurte undersøkelsen og innebærer en rekke presise prosedyrer hvis sluttmål er å identifisere tilstedeværelsen eller fraværet av endring som er forespurt av legen.

Vanligvis brukes bare en liten mengde prøve, resten lagres slik at testen gjentas om nødvendig.

Se hva er de viktigste molekylære teknikkene

PCR

PCR, kort for polymerase-kjedereaksjon, er en molekylærteknikk som består i å amplifisere et fragment av det genetiske materialet, det være seg DNA eller RNA, med sikte på å identifisere mutasjoner og dermed bistå i diagnostisering av sykdommer.

Denne teknikken er laget av utvinning og rensing av det genetiske materialet, som deretter plasseres i en blanding hvor en av komponentene er et restriksjonsenzym som varierer i henhold til den forespurte undersøkelsen og hvis funksjon er å kutte materialet i fragmenter å identifisere en mulig genetisk forandring. Blandingen er plassert i en termocykler, som er et apparat som virker gjennom temperaturvariasjonen som er angitt av den profesjonelle i henhold til undersøkelsen, og på denne måte tillater forsterkningen av det genetiske fragmentet. I tilfelle av konvensjonell PCR, etter amplifisering, blir PCR-produktet underkastet elektroforese, som er en molekylær teknikk basert på vektens og størrelsesordenene av fragmentene, dvs. i henhold til disse karakteristikkene dannes et mønster av bånd, hvor analysen er utført basert på bandet av den positive kontrollen, det vil si i bandet som er kjent for å korrespondere med den genetiske forandringen.

Realtids-PCR, også kalt qPCR, er en type kvantitativ PCR, som i tillegg til å identifisere den genetiske endringen, er i stand til å gi informasjon om genuttrykket, det vil si hvor mye det forandrede genet uttrykkes i organismen, og kan dermed brukes til å hjelpe diagnose og monitor behandling. Real-time PCR krever ikke elektroforese, hele prosessen med forsterkning og analyse av det genetiske materialet utføres av et apparat, og resultatet tolkes av en utdannet helsepersonell.

sekvense

Sekvensering er en molekylær teknikk som består i å bestemme DNA-nukleotidsekvensen. Sequencing skjer fra en PCR-lignende reaksjon, men i amplifikasjonsblandingen tilsettes nukleotider modifisert ved tilsetning av fluorokrom, at når materialet blir forsterket, blir de modifiserte nukleotidene inkorporert i DNA'et og generere flere fragmenter som svarer til produktet av sekvenseringen.

Reaksjonsproduktet er plassert i et apparat kalt en DNA-sekvenser, hvor fragmentene blir rammet av apparatets laser, er fluorokromene begeistret og emitterer fluorescens, som indikeres av apparatet ved hjelp av topper, hver tilsvarende topp til et nukleotid. Ved slutten av reaksjonen vil utstyret informere DNA-sekvensen, og dermed hjelpe legen ved diagnosen av genetiske sykdommer.